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    欧美av.日韩av.亚洲av:液相色谱仪使用过程中会遇到的几个问题?


    发布日期:[2019-06-17] 共阅[62]次

      液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中做相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。亚洲男人天堂,日本一本道高清无码AV,最新高清无码专区在使用过程中通?;嵊龅较旅婕父鑫侍猓?/p>

      1. 色谱柱中的流动相会排干吗?

      不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相,泵将溶剂瓶中的流动相吸干了,HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了?色谱柱还能使用吗?事实上,如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干,并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气,泵也不会将空气排 入色谱柱。因为泵只能输送液体,而不能输送空气。相比之下,另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样,整个色 谱柱干涸的情况不太容易发生,多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了,因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了,也不一定 就不可救药了??梢猿⑹杂靡恢滞耆哑?、表面张力低的溶剂(如经氦气脱气的甲醇)冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面;已脱气的溶 剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。色谱柱大约需要(以1mL/min的流速)冲一个小时或更多的时间被彻底浸润,恢复到正常状态。

      2. 使用PEEK(polyetheretherketone)管路和接头需要注意什么问题?

      如果经常需要改变流路或更换不同品牌的色谱柱,使用PEEK材料制成的管路和接头会非常方便。PEEK管路容易连接;PEEK接头不仅无需工具,手拧即可固定,而且容易调节锥箍之外的管路长度,方便与不同品牌或规格的色谱柱相连接。

      使 用此类材料的管路需要注意的是:PEEK对卤代烷烃的兼容性不好。虽然未观察到上述溶剂溶解PEEK材料的明显迹象,但PEEK遇到上述溶剂会 变脆。另一个西药考虑的因素是压力限。不锈钢管可耐受6000psi的压力,但PEEK管只能耐受近4000psi(但多数HPLC应用系统压力不会超过 3000psi)。

      使用PEEK接头时则无需担心接头耐溶剂性能,因为接头几乎或很少与溶剂直接接触。但手拧固定的PEEK接头压力限低于不锈钢管,因而压力太高时,可能会使接头在管路上滑动而产生死体积或漏液。

      3. 如何预防液相泵的故障:

      要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和试剂的质量,对流动相进行过滤和脱气.下面列出预防泵故障的几项措施:

      1).用高质量试剂和HPLC级溶剂;

      2)、过滤流动相和溶剂;

      3)、脱气;

      4)、每天开始使用时放空排气,工作结束后从泵中洗去缓冲液;

      5)、不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中;

      6)、定期更换垫圈;

      7)、需要时加润滑油;

      8)、查阅有关泵操作手册中的其它建议。

      处于良好操作状态的泵,应该能使色谱图上的基线平稳;保留时间的重复性好。在等度洗脱时压力波动小于2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。

      为了使故障发生后尽快排除,平时应常备密封、单向阀(入口与出口)、泵头装置、各式接头、保险丝等部件,以及更换工具。

       液相色谱仪氘灯使用时有以下几点需要注意的:

      1.氘灯外罩污染:不要用手直接接触氘灯外罩,手上含有的油脂类物质会阻碍氘灯的光源的发射光,导致读数偏低。一旦不小心用手直接接触到了氘灯,在氘灯安装之前可用异丙醇对氘灯做清洁工作。

      2.氘灯的开关频率:频繁的开关及过长时间的开灯等都会对灯的寿命产生影响,一般氘灯点亮后须要30分钟左右的稳定时间。特别注意的是在氘灯刚刚关闭时要等其冷却之后才能再次开启。因为氘灯如果在未冷却状态时被打开,很可能造成灯丝整体结构的烧坏。

      3.避免剧烈物理震荡:如灯是亮着的话,很可能将灯丝弄坏甚至是弄断。(因为当氘灯点亮时其温度有2700K度,此时灯丝几乎是液态的。)

      4.可更换氘灯的信号:

      a.灯的外壳边缘看不见蓝色的光线。(肉眼可见);

      b.石英外套变黑。(灯关时进行检查,冷却并更换);

      c.之前分析方法中从未出现过的非线形现象(光的吸收率不为线形);

      d.在正常设置情况下基线漂移严重;

      e.正常进样时不出峰。

     
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